Transwell细胞培养小室是细胞迁移、侵袭、药物转运、细胞共培养及屏障功能研究中常用的实验工具。
它通过半透膜将细胞培养环境进行分隔，同时允许特定分子和细胞因子进行交换，可根据实验设计实现细胞接触或非接触共培养。
看似简单的Transwell实验，实际操作中却有不少细节容易被忽略。
加液顺序、细胞状态、接种密度、膜面处理以及后续检测方式，都可能影响最终结果。
下面整理4个关键环节，一次掌握Transwell实验中的实用操作要点。
01｜基础操作：加液、换液要规范
Transwell实验通常涉及上室（Apical side）和下室（Basolateral side），不同实验对两侧液体的处理方式有所不同。
① 换液顺序不要弄反
在进行药物转运等实验时，可以参考：
吸液：先下室，后上室
加液：先上室，后下室
这样可以减少操作过程中两侧液体相互干扰的可能。
② 移液时不要碰膜
Transwell膜是细胞生长和迁移的重要界面。
加液、吸液时，枪头应尽量保持适当距离，避免直接接触膜面，以免造成膜损伤，影响细胞贴附及后续实验。
③ 细胞接种后，移动培养板要平稳
细胞接种完成后，如果培养板晃动过大，培养液可能从Insert中溢出，导致细胞分布发生变化。
尤其是悬浮细胞，可能随液体进入下室，从而干扰实验结果。
④ 加液后别忘了检查气泡
加入趋化因子、染液或其他实验液体后，建议观察Insert底部是否存在气泡。
气泡可能影响细胞与膜的接触，也可能干扰细胞培养、染色及后续检测。
👉小结：加液有顺序、移液要轻柔、操作后查气泡，这些基础细节做好，很多实验波动都可以提前避免。
02 细胞接种：合适的状态比“多种一点”更重要
Transwell实验中，细胞状态和接种密度会直接影响迁移、侵袭及转运结果。
✅接种前保持良好细胞状态
建议接种前细胞处于健康、生长良好的状态，融合度一般不宜超过85%–90%。
✅接种密度需要优化
不同细胞的增殖和迁移能力不同，应根据细胞类型及实验目的进行预实验，确定合适的接种量。
✅必要时进行膜表面包被
部分细胞对培养基质有特定要求，如果实验需要包被，Insert膜同样需要进行相应处理。
✅关注细胞传代数
尤其是药物转运等实验，应尽量保持细胞来源、培养条件和传代范围稳定，减少批次差异。
👉小结：细胞状态好、密度合适、条件一致，才能为后续实验打好基础。
03 迁移/侵袭实验：染色、计数和读板同样重要
完成细胞培养后，固定、染色、去除未迁移细胞和计数都会影响最终结果。
✅传统染色计数
采用Swabbing + Staining方法时，应先去除未迁移细胞，再进行固定和染色。
常用染色方法包括：
Crystal Violet｜Hematoxylin｜Giemsa｜Wright's
可根据实验目的选择合适的染色方式。
✅检测时不要只看数字
如果使用荧光读板，还应结合显微镜观察，同时关注：
Receiver Plate与Insert是否匹配
读板模式是否正确
增益等参数是否合理
阴性、阳性及实验对照是否完整
👉结果异常时，不要只怀疑细胞，也要检查耗材、参数和实验设计。
04 AC米兰官网Transwell细胞培养小室
针对细胞迁移、侵袭、药物转运、细胞共培养及屏障功能研究等实验需求，AC米兰官网Transwell细胞培养小室提供多种规格及膜材质选择，帮助满足不同实验场景。
✅多种规格，灵活选择
不同孔板规格及Insert尺寸可供选择，可根据实验通量、细胞数量及实验目的进行匹配。
✅多种膜材质及孔径
根据不同实验需求，可选择合适的膜材质和孔径，满足细胞培养、迁移、侵袭及成像等实验应用。
✅适用于多种实验
可用于：
Cell Migration｜细胞迁移
Cell Invasion｜细胞侵袭
Drug Transport｜药物转运
Cell Co-culture｜细胞共培养
Barrier Function｜屏障功能研究
✅从基础实验到复杂模型
通过不同规格、膜材质及孔径的组合，为不同细胞模型和实验设计提供更多选择。
从细节出发，为细胞实验提供稳定、便捷的实验工具。
欢迎咨询产品规格及免费试用。
